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Enzymatics L6020L 說明書

更新時間:2018-04-11      點擊次數:2857

 

貨號:L6020L

品名:T7 DNA Ligase(T7 DNA連接酶)

產品描述:

T7 DNA連接酶催化雙鏈DNA中5'磷酸和3'羥基末端之間形成磷酸二酯鍵。該酶將加入平端和粘性末端以及修復雙鏈DNA中的單鏈缺口。

 

規格:

900,000 U

濃度

3,000,000 U/ml

保存

-25°C至-15°C

純度(SDS-PAGE)

> 99%

活性:

3,000,000 U/mg

SS核酸外切酶

30,000 U <1.0% released

DS核酸外切酶

30,000 U <1.0% released

DS內切核酸酶

30,000 U = No conversion

大腸桿菌 DNA污染

30,000 U <10 copies

其他

1.在沒有高濃度擁擠劑(例如20-30%PEG 6-8000)的情況下,T7 DNA連接酶的特異性活性在平末端片段上減少1000倍(1,2)。

2.T7 DNA連接酶不能連接單鏈DNA的片段(1)。

 

蛋白質來源

攜帶T7 DNA連接酶基因的重組大腸桿菌菌株。

 

提供

20mM Tris-HCl 
50mM NaCl 
1mM DTT 
0.1mM EDTA 
50%甘油
pH 7.5在25℃

 

隨附:

 

B1010 (2X Rapid Ligation Buffer)

2X Rapid Ligation Buffer (B1010):
132mM Tris-HCI
20 mM MgCl2
2 mM DTT
2 mM ATP
15% PEG 6000
pH 7.6 @ 25°C

 

單位定義 
1單位定義為在23℃30分鐘內連接50ng 100ng DNA的片段與粘性末端所需的T7 DNA連接酶的量。

 

質量控制分析

 

單位表征測定
單位活性使用2倍系列稀釋法測量。在1X快速連接緩沖液中進行酶稀釋,并加入到20μL含有雙鏈DNA的片段和1X快速連接緩沖液的反應中。將反應在?23℃(室溫)孵育30分鐘,在冰上沉降,并在用溴化乙錠染色的1%瓊脂糖凝膠上分析。

 

蛋白質濃度(OD 280)測量使用使用2.0mg / ml BSA樣品(Pierce Cat#23209)標準化的Nanodrop ND-1000分光光度計
在OD 280處分析2.0μL酶樣品并用產品儲存溶液沖切。觀察到的3個重復樣品的平均測量值使用67,850的消光系數和41,132道爾頓的分子量轉換為mg / mL。

 

SDS-Page(物理純度評估)

將2.0μL濃縮的酶溶液加載到變性的4-20%Tris-甘氨酸SDS-PAGE凝膠上,該凝膠側翼為寬范圍的MW標記和2.0μL的樣品的1:100稀釋物。電泳后,將凝膠染色并比較??樣品以確定物理純度。該測試的驗收標準要求濃縮樣品中污染帶的總量不超過稀釋樣品中目的蛋白質條帶的質量,確認濃縮樣品的純度大于99%。

 

污染測試

單鏈核酸外切酶活性
將含有10,000cpm放射性標記的單鏈DNA底物和10μL酶溶液的50μL反應物在37℃下溫育4小時,導致TCA可溶性計數的釋放小于1.0%。

 

雙鏈切核酸酶活性將含有5,000cpm放射性標記的雙鏈DNA底物和10μL酶溶液的50μL反應物在37℃下溫育4小時,導致TCA可溶性計數的釋放小于1.0%。


雙鏈核酸內切酶活性將含有0.5μgpBR322 DNA和10μL酶溶液的50μL反應物在37℃下溫育4小時,結果通過瓊脂糖凝膠電泳確定沒有肉眼可察覺地轉化為帶切口的環狀DNA。

 

大腸桿菌  16S rDNA污染測試
復制酶溶液的5uL樣品變性,并在TaqMan qPCR測定中篩選污染性大腸桿菌基因組DNA,使用對應于16S rRNA基因座的寡核苷酸引物。測試的驗收標準是由3個重復的無模板對照樣品的平均值產生的閾值循環計數(C t)。基于無模板對照 Ct  值與標準曲線數據之間的相關性,該測定的檢測限為<10拷貝基因組/樣品。

 

 

 

部分產品信息:

貨號

品名

規格

濃度

品牌

N2070-10-L

 ATP Solution 

50 µmol

10 mM

Enzymatics

N2050-10-L

10 mM dNTP Solution Mix

100 µmol

10 mM

Enzymatics

N2010L

100 mM 75µmol dNTP Solution Set 

75 µmol

100 mM

Enzymatics

N2010-A-L

100 mM dATP Solution 

75 µmol

100 mM

Enzymatics

N2050L

100µmol dNTP Solution Mix 

100 µmol

25 mM

Enzymatics

Y9180L

10x Uracil Cleavage System 

750 Reactions

N/A

Enzymatics

P7670

2x HiFi PCR Master Mix 

1 rxn

2x

Enzymatics

Y9420L

5x ER/A-Tailing Enzyme Mix 

24 reactions

N/A

Enzymatics

Y9380L

E. coli Pyrophosphatase 

50 U

100 U/mL

Enzymatics

Y9030L

E. coli Single-Stranded DNA Binding Protein 

1.5 mg

2.75 mg/ml

Enzymatics

Y9140-HC-L

End-Repair Mix (High Concentration) 

75 Reactions

1 Rxn/µL

Enzymatics

Y9140-LC-L

End-Repair Mix (Low Concentration) 

200 Reactions

1 Rxn/µL

Enzymatics

Y9080L

Endonuclease VIII 

10,000 U

10,000 U/ml

Enzymatics

P7600L

EnzScript™ (MMLV Reverse Transcriptase RNase H-) 

10,000 U

200,000 U/mL

Enzymatics

X8010L

Exonuclease I 

30,000 U

20,000 U/ml

Enzymatics

X8020L

Exonuclease III 

50,000 U

100,000 U/ml

Enzymatics

P7010-HC-L

Klenow (3′→ 5′ exo-) (High Concentration) 

10,000 U

50,000 U/ml

Enzymatics

P7010-LC-L

Klenow (3′→ 5′ exo-) (Low Concentration) 

10,000 U

5,000 U/ml

Enzymatics

P7060L

Klenow Fragment 

2,500 U

5,000 U/ml

Enzymatics

X8030L

Lambda Exonuclease 

10,000 U

5,000 U/ml

Enzymatics

P7040L

M-MuLV Reverse Transcriptase 

100,000 U

200,000 U/ml

Enzymatics

P7090L

Mako DNA Polymerase (3′→ 5′ exo-) 

3,000 U

30,000 U/ml

Enzymatics

P7140-HC-L

Manta 1.0 DNA Polymerase (High Concentration) 

100,000 U

400,000 U/ml

Enzymatics

P7140-LC-L

Manta 1.0 DNA Polymerase (Low Concentration) 

100,000 U

40,000 U/ml

Enzymatics

P7610L

NGS Library Prep: 2X VeraSeq™ PCR Mix – 250 Reactions 

250 Reactions

2X

Enzymatics

P7590L

Phoenix™ Hot Start Taq DNA Polymerase 

500 U

5,000 U/ml

Enzymatics

P7460L

Poly(A) Polymerase 

1,000 U

5,000 U/mL

Enzymatics

Y9260L

RecA 

1.5 mg

2.0 mg/mL

Enzymatics

Y9220L

RNAse H 

5,000 U

5,000 U/ml

Enzymatics

Y9240L

RNAse Inhibitor 

20,000 U

40,000 U/ml

Enzymatics

L6010L

T3 DNA Ligase 

900,000 U

3,000,000 U/ml

Enzymatics

L6030-LC-L

T4 DNA Ligase 

150,000 U

120,000 U/ml

Enzymatics

L6030-HC-L

T4 DNA Ligase (Rapid) 

240,000 U

600,000 U/ml

Enzymatics

P7080L

T4 DNA Polymerase 

2,000 U

3,000 U/ml

Enzymatics

Y9130L

T4 Gene 32 Protein 

1.0 mg

10 mg/mL

Enzymatics

Y9040L

T4 Polynucleotide Kinase 

10,000 U

10,000 U/ml

Enzymatics

L6050L

T4 RNA Ligase 1 

10,000 U

20,000 U/ml

Enzymatics

L6080L

T4 RNA Ligase 2 

4,500 U

30,000 U/ml

Enzymatics

L6070L

T4 RNA Ligase 2 Truncated 

500 U

5,000 U/ml

Enzymatics

L6020L

T7 DNA Ligase 

900,000 U

3,000,000 U/ml

Enzymatics

P7260L

T7 DNA Polymerase 

3,500 U

10,000 U/ml

Enzymatics

P7180L

T7 RNA Polymerase 

50,000 U

50,000 U/ml

Enzymatics

L6060L

Taq DNA Ligase 

20,000 U

40,000 U/ml

Enzymatics

P7110L

Taq DSC 2.0 DNA Polymerase 

1,250 U

5,000 U/ml

Enzymatics

P7250L

Taq-B DNA Polymerase 

10,000 U

5,000 U/ml

Enzymatics

P7620L

TaqIT 

5,000 U

50,000 U/mL

Enzymatics

P7070L

Terminal deoxynucleotidyl Transferase (TdT) 

6,000 U

20,000 U/ml

Enzymatics

G5020L

Thermolabile UDG 

500 U

1,000 U/ml

Enzymatics

Y9370L

Thermostable Pyrophosphatase 

1,250 U

2,000 U/ml

Enzymatics

G5010L

Uracil DNA Glycosylase 

10,000 U

2,000 U/ml

Enzymatics

P7511L

VeraSeq™ 2.0 High-Fidelity DNA Polymerase 

500 U

2,000 U/ml

Enzymatics

P7520L

VeraSeq™ ULtra DNA Polymerase 

500 U

2,000 U/ml

Enzymatics

L6030-W-L

WGS Ligase 

24 Reactions

N/A

Enzymatics

P7640L

ZipScript™ One-Step RT-qPCR Kit 

1000 Reactions

N/A

Enzymatics

P7020-HC-L

φ29 DNA Polymerase (High Concentration) 

2,000 U

100,000 U/ml

Enzymatics

P7020-LC-L

φ29 DNA Polymerase (Low Concentration) 

2,000 U

10,000 U/ml

Enzymatics

 

世界*實驗材料供應商 Enzymatics正式授權上海起發為其中國代理, Enzymatics在一直是行業的*,一直為廣大科研客戶提供zui為的產品和服務,上海起發一直秉承為中國科研客戶帶來的產品,的服務,簽約 Enzymatics就是為了給廣大科研客戶帶來更加完善的產品和服務,您的滿意將是我們zui大的收獲

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上海起發實驗試劑有限公司
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